Пост-трансляционные модификации хромобелка ASFP595

А.А. Пахомов, В.И. Мартынов
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН,
г. Москва


Флуоресцентные белки нашли широкое применение в современной молекулярной и клеточной биологии и биотехнологии при изучении процессов проходящих в живых системах. Пост-трансляционные модификации во флуоресцентных белках GFP-семейства протекают внутри белковой глобулы и приводят к синтезу хромофорной групы, в основном и отвечающей за уникальные свойства этих белков. Автокаталитические реакции окисления хромофора являются одной из причин сдвига их спектров в красную и дальне-красную области (550 – 650 нм). В настоящей работе мы провели изучение реакций окисления, приводящих к батохромному сдвигу в спектрах фотоактивируемого белка asFP595. Анализ кинетики созревания показал, что аналогично другим красным флуоресценным белкам на промежуточной стадии образуется незрелая форма, содержащая протонированный хромофор (поглощение при 420 нм), которая изобестически превращается в конечную зрелую форму (568 нм). Масс-спектрометрический анализ хромофорсодержащего пептида, выделенного из незрелого asFP595, показал, что промежуточная форма содержит хромофор GFP-типа. Также было установлено, что в ходе окисления хромофора GFP-типа и образования зрелого белка, происходит выделение эквимолярного количества пероксида водорода.

Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки в рамках ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России на 2009-2013 годы». 


Назад к списку